氨基柱是指以硅胶作为基质载体,键合氨基的色谱柱。氨基柱通常用于分析糖类化合物,所用流动相通常是甲醇、乙腈和缓冲盐溶液,乙腈相对使用较多。氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比c18,c8柱的键合官能团c18,c8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件下使用时,要特别注意控制ph值范围,ph值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时,kromasil专家所给的建议是:
用5-10倍的柱体积的含0.5- 1.0%nh3的50-50乙
腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如luna氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。而我们做糖分析是用反相流动相,所以要先用异丙醇过渡。